蛋白純化實(shí)驗中出現沉淀的原因分析

　　在蛋白制備實(shí)驗過(guò)程中，蛋白純化可以說(shuō)是一個(gè)非常重要的問(wèn)題，只有將蛋白純化到一定濃度后，蛋白的作用才會(huì )更強，實(shí)驗的才能更好達到我們想要的效果。但是，在實(shí)驗中我們常常會(huì )遇到各種各樣的問(wèn)題，比如蛋白沉淀，就是非常常見(jiàn)的問(wèn)題之一。那么，到底是什么原因導致蛋白沉淀的呢?今天普健生物就和大家具體分析分析。

　　如果完全按照實(shí)驗設計過(guò)程而來(lái)的話(huà)，一般都不會(huì )出現沉淀的情況，如果發(fā)生沉淀，那么就一定是外部環(huán)境發(fā)生了變化。

　　1、PH值變化。理論上來(lái)說(shuō)，蛋白有一個(gè)等電點(diǎn)，當PH值在蛋白等電點(diǎn)附近的時(shí)候，就會(huì )出現蛋白沉淀的現象;

　　2、濃度過(guò)高。日常實(shí)驗中，我們配置的溶液環(huán)境不一定符合蛋白的生存環(huán)境，除了溫度和PH值外，最主要的就是鹽離子濃度。如果鹽離子濃度過(guò)高的話(huà)，就會(huì )出現鹽析現象，最終造成蛋白沉淀;

　　3、重金屬脫落。在對蛋白進(jìn)行Ni純化處理時(shí)，其中的一些鎳離子會(huì )脫落，而這些脫落的重金屬則會(huì )造成蛋白的沉積，最終造成沉淀現象;

　　4、凍融次數過(guò)多。對蛋白進(jìn)行反復凍融會(huì )在一定程度上傷害蛋白，對離子和緩沖液造成影響;

　　5、滋生細菌。如果將蛋白長(cháng)時(shí)間放置在4度的環(huán)境下，則容易滋生細菌，自然會(huì )造成蛋白沉淀;

　　總的來(lái)說(shuō)，造成蛋白的原因都是一些細節方面的操作問(wèn)題，如果我們在實(shí)驗中嚴格按照實(shí)驗步驟，并且時(shí)刻關(guān)注溶液的PH值、溫度、濃度，同時(shí)盡量做到盡快使用，避免反復凍融，這樣，就能從根本上減少蛋白純化中沉淀情況的發(fā)生。武漢普健生物專(zhuān)業(yè)為廣大用戶(hù)提供蛋白純化服務(wù)，如果您有相關(guān)需求，歡迎來(lái)電咨詢(xún)。