掌握如下的方法，從此蛋白表達不用愁

　　蛋白表達的重要性我們就不在這里一一贅述了，就我們所知的抗體其實(shí)也是蛋白之一，所以，做好蛋白就標志著(zhù)我們能否做好各種蛋白抗體產(chǎn)品。蛋白生產(chǎn)的過(guò)程其實(shí)不困難，其實(shí)就是將需要表達的片段添加到DNA中，成成nRNA，然后表達出需要的蛋白產(chǎn)品。說(shuō)起來(lái)簡(jiǎn)單，但是做起來(lái)非常的困難。下面，普健生物就和大家具體聊聊蛋白的表達過(guò)程。

　　蛋白的合成過(guò)程看起來(lái)并不困難，其實(shí)就是從DNA到mRNA，表達出來(lái)，就是蛋白了。

　　一般的操作流程如下：

　　1、克隆或合成目的基因

　　2、構建載體

　　3、蛋白表達、純化及檢驗

　　4、大量表達

　　表達系統操作的詳細步驟和所需時(shí)間：

　　1、基因合成及密碼子優(yōu)化(一般需要耗時(shí)1-2周);

　　2、載體構建。我們需要將目標DNA克隆至表達載體上，然后對質(zhì)粒進(jìn)行測序，測序合格后，再進(jìn)行大量質(zhì)粒的制備(一般這個(gè)過(guò)程需要持續1-2周);

　　3、瞬時(shí)表達評估。主要進(jìn)行瞬時(shí)表達及表達水平檢測(通常需要耗時(shí)2周);

　　4、穩定細胞株開(kāi)發(fā)。主要進(jìn)行細胞的穩定轉染及篩選，MTX擴增及篩選，細胞建庫等工作(一般來(lái)說(shuō)需要耗時(shí)12-20周);

　　5、大量表達。在如上的過(guò)程正常實(shí)現后，將細胞投入大量生產(chǎn)，并對其進(jìn)行純化工作(一般耗時(shí)2-3周);

　　總的說(shuō)來(lái)，蛋白表達的過(guò)程其實(shí)并不顯得特別的困難，相比單克隆抗體的制備過(guò)程來(lái)說(shuō)，也不那么繁瑣，但是，如果不注意相應的細節問(wèn)題，依然容易出現失敗的情況。所以，在日常制備單邊的過(guò)程中，我們需要注意到一些細節方面的問(wèn)題。普健生物為您提供專(zhuān)業(yè)的蛋白制備服務(wù)，如果您有相關(guān)需求，歡迎來(lái)電咨詢(xún)。