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說(shuō)到重組蛋白表達，相信大家已經(jīng)不再陌生了，因為在一些藥品的使用中會(huì )經(jīng)常使用到。而對于實(shí)驗室來(lái)說(shuō)，重組蛋白制備實(shí)驗可以說(shuō)是非常的常見(jiàn)，而且操作起來(lái)也非常的規范。那么，蛋白的制備是不是就非常的簡(jiǎn)單了呢?其實(shí)不然!在日常重組蛋白表達的實(shí)驗中，我們需要注意如下的一些事項。
1、如何得到可溶性的蛋白
這個(gè)問(wèn)題也是我們蛋白表達過(guò)程中最常見(jiàn)的問(wèn)題之一，雖然說(shuō)蛋白表達出來(lái)了，但是卻不溶，導致所得蛋白無(wú)法使用。一般這個(gè)情況，就是因為我們選擇的表達菌株不對，需要更換合適的菌株才行;
2、如何讓蛋白產(chǎn)量最大化
主要還是因為溫度的緣故。經(jīng)實(shí)驗發(fā)現，在37度的環(huán)境下，蛋白容易出現包涵體，而在30度的時(shí)候，可溶性蛋白的產(chǎn)量會(huì )提升，15-20度的環(huán)境下，誘導性蛋白的產(chǎn)量會(huì )達到最大;
3、如何避免包涵體和內毒素的產(chǎn)生
包涵體的產(chǎn)生主要是因為蛋白溶解性達到最大后，導致蛋白析出的情況。所以，這個(gè)時(shí)候我們不妨換個(gè)角度，用無(wú)細胞表達系統來(lái)試試，通過(guò)實(shí)驗，它不僅能有效避免包涵體、內毒素等物質(zhì)的產(chǎn)生，而且蛋白表達率也很高;
當然了，重組蛋白表達需要注意的事項并不止我們說(shuō)的如上幾個(gè)方面，具體操作中很多細節方面也要引起注意，否則也可能會(huì )造成蛋白表達的失敗。當然了，按照相關(guān)文獻給與的方式操作下來(lái)，一般都不會(huì )出現太大問(wèn)題，只是因為相關(guān)投入與產(chǎn)出難成正比，制備的蛋白無(wú)法滿(mǎn)足實(shí)驗需求等問(wèn)題，可能會(huì )對您造成困擾。武漢普健生物專(zhuān)業(yè)為廣大用戶(hù)提供重組蛋白制備服務(wù)，如果您有相關(guān)需求，歡迎來(lái)電咨詢(xún)。
