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大腸桿菌表達系統作為五大蛋白表達系統之一，因為其使用最早、遺傳背景清晰等特點(diǎn)，使得其即便在表達系統越來(lái)越多的今天，依然是主要的工具。因為大腸桿菌增殖時(shí)間較短，表達起來(lái)非常的快捷，一般的重組蛋白在大腸桿菌中一周之內就能表達成功。那么，大腸桿菌表達系統還有什么其他特點(diǎn)呢?今天普健生物就和大家具體聊聊。
1、可形成包涵體
一般來(lái)說(shuō)，非真核生物表達的蛋白都不會(huì )形成包涵體，但是，大腸桿菌這類(lèi)的過(guò)表達原核生物會(huì )形成包涵體，而且在大腸桿菌中，蛋白修飾后翻譯、折疊的效率要比真核細胞高10倍以上，從而促進(jìn)包涵體的形成。
包涵體會(huì )在極大程度上影響可溶性活性蛋白的產(chǎn)生，但也因為如此，使得其不易被蛋白酶降解，從而減少被其他蛋白污染的發(fā)生。當然了，通過(guò)一定的手段，也可以將包涵體再折疊成可溶性蛋白;
2、通過(guò)溫度來(lái)減少包涵體的形成
將溫度保持在15-30度之間，能夠形成更多可溶性蛋白的同時(shí)，盡可能少地形成包涵體。據研究顯示，這個(gè)區間的溫度可能會(huì )在一定程度上降低蛋白的轉率、折疊的效率，從而促進(jìn)蛋白的正確折疊。而且這個(gè)溫度下，能夠有效降低蛋白酶的活性，更大可能性地保持蛋白活性;
3、可添加融合標簽提高重組蛋白可溶性
和其他重組蛋白表達方式一樣，在大腸桿菌表達系統中，我們可以適當地加入一些融合標簽來(lái)促進(jìn)蛋白的可溶性。同時(shí)，可以通過(guò)精確地對融合標簽進(jìn)行切除、融合等手段，有效控制蛋白的制備;
4、形成二硫鍵
一般來(lái)說(shuō)，大腸桿菌因為有二硫鍵氧化還原酶的催化作用，使得其為大腸桿菌表達系統二硫鍵唯一形成的場(chǎng)所。所以，我們可以通過(guò)多大腸桿菌的基因組進(jìn)行修改，從而在細胞質(zhì)內形成一個(gè)更好的二硫鍵形成環(huán)境;
5、可翻譯后修飾
相對其他表達系統來(lái)說(shuō)，大腸桿菌對蛋白翻譯后修飾的能力有限，需要有針對性地進(jìn)行優(yōu)化;
所以，對于一個(gè)表達系統而言，其表達的蛋白是否高質(zhì)量，更多程度上取決于蛋白本身特性，只有針對相對合適的表達系統，才能實(shí)現高表達、高質(zhì)量的蛋白產(chǎn)品，因為對于一個(gè)表達系統來(lái)說(shuō)，其一定存在優(yōu)勢和不足之處。所以，如果想要實(shí)現蛋白的高質(zhì)量表達，合適的表達系統選擇是首要的。普健生物專(zhuān)業(yè)為廣大用戶(hù)提供大腸桿菌蛋白表達服務(wù)，如果您有相關(guān)需求，歡迎來(lái)電咨詢(xún)。
