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穩定細胞株是一種用于大量且穩定表達蛋白的一種方式，不僅可以表達蛋白，而且還能進(jìn)行相關(guān)藥物篩選以及基因表達，使用范圍非常的廣泛。但是，對于很多企業(yè)來(lái)說(shuō)，都不會(huì )選擇通過(guò)構建穩定細胞株來(lái)表達蛋白，因為對于他們來(lái)說(shuō)，穩定細胞株構建非常的困難，性?xún)r(jià)比相對較低。為什么穩定細胞株構建這么困難呢?下面，普健生物和大家具體聊聊。
我們知道，外源基因的表達主要采用兩種方式，一種是瞬時(shí)表達，另外一種是穩定表達。
瞬時(shí)表達：將外源DNA克隆到質(zhì)粒中，而非將其整合到宿主細胞的染色體中。瞬時(shí)表達能夠迅速實(shí)現蛋白的表達，但是也只能持續幾天。瞬時(shí)表達的穩定性相對較差，而且在不同實(shí)驗中差異性較大，且無(wú)法長(cháng)久;
穩定表達：直接將外源DNA整合到宿主細胞的染色體中，通過(guò)細胞篩選的方式，實(shí)現宿主細胞長(cháng)期表達目的蛋白的方式;
但是，問(wèn)題出現了。想要將外源基因整合到宿主細胞的染色體中相對困難，成功率非常的低，通常會(huì )發(fā)生隨機整合，表達水平會(huì )受到整合位置、周?chē)旧w原件等因素的影響。所以，如果我們想要獲得能夠進(jìn)行穩定表達，則需要進(jìn)行大量的篩選工作。
什么情況下需要構建穩定細胞株?
1、對于那些需要長(cháng)期研究的目標細胞來(lái)說(shuō)，可以通過(guò)構建穩定細胞株來(lái)實(shí)現;
2、對于一些半衰期極長(cháng)，盡可以通過(guò)RNA干擾卻無(wú)法表達的蛋白，只有通過(guò)穩定細胞株來(lái)實(shí)現;
3、對于那些無(wú)法進(jìn)行精確表達的細胞;
4、需要用到細胞的;
穩定細胞株的構建要點(diǎn)有哪些?
穩定細胞株構建是一個(gè)長(cháng)期的過(guò)程，所以，從質(zhì)粒構建、病毒包裝、細胞感染以到細胞篩選等過(guò)程，都需要引起注意，因為任何一個(gè)細節方面的錯誤都可能造成耗時(shí)大半年的項目付諸流水。
穩定細胞株構建能夠在極大程度上解決蛋白穩定表達的問(wèn)題，對于一些需要長(cháng)期制備或者需要進(jìn)行細胞的長(cháng)期研究時(shí)，都可以通過(guò)穩定細胞株來(lái)解決。當然了，對于穩定細胞株的構建，除了需要相關(guān)技術(shù)支持外，還需要有精細且細節方面的操作，只有在各個(gè)方面做好了，才能在更大程度上保證其構建成功。普健生物專(zhuān)業(yè)為廣大用戶(hù)提供穩定細胞株構建服務(wù)，如果您有相關(guān)需求，歡迎來(lái)電咨詢(xún)。
