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前面我們和大家聊過(guò)有關(guān)穩定細胞株的構建原理及方法，如果沒(méi)有看過(guò)，您可以點(diǎn)擊“穩轉細胞株的構建-構建原理及其構建方法盤(pán)點(diǎn)”進(jìn)行查看。但是因為篇幅所限，上次沒(méi)能聊到有關(guān)穩定細胞株的構建方法。所以，今天普健生物在這里就和大家具體聊聊有關(guān)穩定細胞株構建的幾個(gè)常用方法及其適用范圍。
穩定細胞株的構建方法主要有三種：
1、單克隆環(huán)法。這個(gè)方法多用于針對哪些整合率低卻有需要獲得單克隆株的方法。不過(guò)相比其他方法來(lái)說(shuō)，這個(gè)方法的工作量相對較小，只需將轉染后的細胞按照一定的密度轉移到新的細胞皿中，然后采用藥物進(jìn)行篩選，最后挑選出合適的單克隆細胞株即可。但是也正因為操作過(guò)于見(jiàn)到，導致其中容易出現所產(chǎn)生的細胞株不純，最終失去生長(cháng)上的優(yōu)勢，導致失去穩定細胞株;
2、96孔單克隆稀釋法。這個(gè)方法同樣適用于整合率低的轉染或需要得到但隔開(kāi)了細胞株的實(shí)驗。從理論上來(lái)說(shuō)，這個(gè)方法能夠得到非常單一的單克隆抗體，同時(shí)可以篩選出懸浮穩定細胞株。只不過(guò)因為過(guò)程繁瑣，所以工作量相對要大一些;
3、逆轉錄病毒混合克隆制備法。如果需要制備混合穩定株，這個(gè)方法就顯得非常的合適了。這個(gè)不僅能讓我們在短時(shí)間內獲得穩定細胞株，而且能夠將所得細胞稀釋液轉移到新的器皿中，最終獲得單克隆細胞株。只不過(guò)這個(gè)方法需要進(jìn)行逆轉錄，相對來(lái)說(shuō)，技術(shù)更加復雜，需要技術(shù)人員具備一定的實(shí)力才行;
當然了，隨著(zhù)技術(shù)的發(fā)展，有更多的方法被設計出來(lái)，能夠應對各種不同的使用場(chǎng)景需求。所以，在后來(lái)，我們完全可以選擇一種成本更低工作量更小技術(shù)需求更低的方式。普健生物專(zhuān)業(yè)為廣大用戶(hù)提供穩定細胞株構建服務(wù)，如果您有相關(guān)需求，歡迎來(lái)電咨詢(xún)。
