隨著(zhù)生物技術(shù)的發(fā)展,越來(lái)越多的方法開(kāi)始在抗體藥物生產(chǎn)中投入使用??贵w藥物開(kāi)發(fā)是一個(gè)非常繁瑣的過(guò)程,而穩定細胞株則幾乎適用于抗體藥物開(kāi)發(fā)的各個(gè)階段。無(wú)論是重組蛋白、抗體生產(chǎn),還是檢測分析和功能性研究,幾乎都適合使用。今天,普健生物就和大家具體聊聊有關(guān)穩定細胞株構建的原理及方法。
其實(shí)很多人禁不住地想問(wèn):什么是穩定細胞株?它到底是個(gè)什么操作?
所謂的穩定細胞株,其實(shí)就是能夠實(shí)現穩定表達的細胞株,基于某一細胞系構建的持續性過(guò)表達或干擾特定基因的細胞系。我們知道一般的細胞是無(wú)法實(shí)現持續表達的,而穩定細胞株則能夠通過(guò)一定的方法讓細胞實(shí)現穩定持續性表達;
穩定細胞株的構建原理是什么?
通過(guò)基因技術(shù)將外源DNA或RNA克隆到具備某種抗性的載體上,重組的載體則會(huì )整合到染色體中,并隨著(zhù)細胞的分裂穩定傳導下去,而后再對細胞進(jìn)行篩選,這樣就能獲得我們所需能夠實(shí)現穩定表達的細胞株;
為什么要用到穩定細胞系?
1、使用穩定細胞系能夠有效降低頻繁轉染的成本;
2、可以更好地實(shí)現基因干擾表達的結果;
3、避免因為人為原因所造成的結果不準確的情況;
什么時(shí)候需要用到穩定細胞系?
1、外源基因需要實(shí)現長(cháng)期穩定表達時(shí);
2、需要使用到誘導表達系統時(shí);
3、目的基因過(guò)表達或需要跟然時(shí)空特異性時(shí);
4、細胞或病毒無(wú)法實(shí)現高傳導效率時(shí);
5、需要向動(dòng)物體內注射外源表達片段細胞時(shí);
6、細胞個(gè)體存在差異時(shí);
7、需要將外源片段插入基因組中時(shí);
而目前常用的穩定細胞構建方法主要有三種:?jiǎn)慰寺…h(huán)法、96孔單克隆稀釋法、逆轉錄病毒混合克隆制備法,這些方法我們將在后期和大家具體介紹,本次就不贅述了。
總的來(lái)說(shuō),穩定細胞株的構建能夠在極大程度上避免一些重組蛋白所產(chǎn)生的無(wú)法表達的情況,以及應對一些細胞無(wú)法實(shí)現高表達的情況。當然了,穩定細胞株也非萬(wàn)能的,在很多情況下反倒會(huì )造成相關(guān)資源的損耗,所以,需要結合實(shí)際情況來(lái)進(jìn)行選擇。普健生物專(zhuān)業(yè)為您提供穩定細胞株構建服務(wù),如果您有相關(guān)需求,歡迎來(lái)電咨詢(xún)。