穩定細胞株篩選的一般流程是怎樣的?

　　穩定細胞株篩選技術(shù)在生物技術(shù)工程中是一項非常常用的技術(shù)，通過(guò)這個(gè)操作，能夠篩選出可以穩定表達目的基因的細胞株。我們知道，穩定細胞株構建的目的就是為了能夠得到可以持續表達的細胞，所以，篩選過(guò)程類(lèi)似提純的過(guò)程。那么，穩定細胞株篩選的一般流程是怎樣的呢?今天，普健生物就和大家具體聊聊。

　　1、載體構建。選擇合適的載體，然后將目的基因的DAN序列或蛋白編碼序列克隆到合適的表達載體中，并構建成重組質(zhì)粒;

　　2、細胞轉染。將構建好的載體通過(guò)試單更多技術(shù)轉染到目標細胞中(通常采用化學(xué)發(fā)、電穿孔法或病毒載體介導等方法)，通過(guò)細胞來(lái)進(jìn)行目標蛋白的表達;

　　3、選擇標記引入。轉染后，將選中標記引入到細胞培養基中，從中挑選包含標記的細胞繼續培養，無(wú)標記的則剔除掉(這個(gè)方法對蛋白表達本身沒(méi)有太大意義，但是能夠幫助我們挑選出包含目的基因的細胞);

　　4、單克隆挑選。將進(jìn)過(guò)篩選后的細胞進(jìn)行單克隆培養，篩選出能夠穩定表達且高表達的細胞，并對其進(jìn)行克隆;

　　5、穩定性驗證。對穩定細胞系進(jìn)行驗證，確保目的基因的穩定高效表達;

　　6、功能性驗證。對穩定細胞株進(jìn)行功能型驗證，以確保所得蛋白能夠我們的需求;

　　總的來(lái)說(shuō)，穩定細胞株篩選是一個(gè)非常復雜的過(guò)程，需要具備相當程度的耐性和細心，知道獲得自己所需目的基因的細胞株為止。普健生物作為一家具備多年蛋白抗體制備和定制經(jīng)驗的公司，專(zhuān)業(yè)為您提供穩定細胞株構建及篩選服務(wù)，如果您有相關(guān)需求，歡迎來(lái)電咨詢(xún)。