穩定細胞株構建時(shí)如何提升細胞轉染效率?

　　在進(jìn)行穩定細胞株構建時(shí)，為了將目的蛋白基因載入到宿主細胞中，我們都會(huì )選擇通過(guò)轉染的方式來(lái)實(shí)現?？梢哉f(shuō)，轉染的成功與否，直接關(guān)系到目的蛋白表達的結果。那么，我們在進(jìn)行穩定細胞株細胞轉染時(shí)，有沒(méi)有什么辦法提升其轉染效率，起到事半功倍的效果呢?今天，普健生物就和大家具體聊聊。

　　我們知道，常用的細胞轉染方法主要有三種，分別是生物轉染、物理轉染以及化學(xué)轉染。

　　生物轉染：其實(shí)就是通過(guò)病毒感染的方式，將目標蛋白DNA整合到宿主細胞中去;

　　物理轉染：通過(guò)電穿孔、細胞注射等方法，直接將目的蛋白DNA注入到宿主細胞中去(不過(guò)容易造成細胞死亡);

　　化學(xué)轉染：利用陽(yáng)離子與陰離子核酸結合的特性，使得兩者相互吸引，從而實(shí)現轉染;

　　從上面的描述我們不難看出，對于不同的轉染方法，其有著(zhù)不同的優(yōu)勢和劣勢，其轉染效率主要和如下幾個(gè)方面有關(guān)：

　　1、細胞活力。轉染成功率和細胞活性有著(zhù)極大的關(guān)系，自然是活力越強，轉染的成功率就越高，而且和細胞類(lèi)型也有著(zhù)一定的關(guān)系;

　　2、細胞融合度。融合度越高，能夠在一定程度上提升細胞轉染的接受程度;

　　3、核酸類(lèi)型。簡(jiǎn)單核酸類(lèi)型轉染成功率更高，反之越是復雜，成功率相對月低;

　　4、轉染方法。對于不同類(lèi)型的細胞選擇不同類(lèi)型的轉染方法其成功率存在著(zhù)極大的不同;

　　所以，想要提升穩定細胞株細胞轉染的目的，我們可以從如下幾個(gè)方面入手：

　　1、選擇活性高的細胞。盡量選擇那些細胞活性高的細胞，避免選擇活性低的細胞;

　　2、提升核酸純度。細胞轉染時(shí)需要保證目的DNA與RNA盡可能同質(zhì)，確保每個(gè)步驟不收RNA酶的影響;

　　3、合適的細胞密度。需要控制好細胞密度，過(guò)高或過(guò)低都會(huì )造成轉染效率變低;

　　4、選擇合適的轉染方法。根據細胞的類(lèi)型選擇合適的轉染方法，不要一直使用單個(gè)轉染方法;

　　總的來(lái)說(shuō)，我們在穩定細胞株細胞轉染時(shí)，需要結合細胞類(lèi)型及其細胞活性來(lái)進(jìn)行方法選擇，在轉染過(guò)程中需要注意到各類(lèi)細節問(wèn)題，只有這樣，才能更好地保證實(shí)驗的成功。武漢普健生物專(zhuān)業(yè)為廣大用戶(hù)提供穩定細胞株構建服務(wù)，如果您有相關(guān)需求，歡迎來(lái)電咨詢(xún)。