穩定細胞株的概念簡(jiǎn)介以及它的構建方法

　　當我們一些實(shí)驗需求時(shí)，我們常常會(huì )用到穩定細胞株構建技術(shù)，比如：需要頻繁轉染、提升基因干擾效果、需要進(jìn)行極高拷貝數的表達等等。而穩定細胞株技術(shù)就是在活細胞的狀態(tài)下，通過(guò)大量多代的培養所得的細胞。這類(lèi)細胞不僅具有正常的生理功能，而且可以實(shí)現無(wú)限繁殖，能夠穩定地表達蛋白。

　　穩定細胞株的構建主要包括如下過(guò)程：

　　1、構建載體。

　　2、轉染、感染。

　　3、目的蛋白檢測。

　　4、抗生素篩選。

　　5、目的蛋白再次檢測。

　　6、細胞株穩定性檢測。

　　穩定細胞株的構建一般采用兩種方法：體質(zhì)轉染后的單克隆穩定株;二是應用逆轉錄病毒，慢病毒轉染，從而篩選穩定細胞株。

　　通常情況下，我們會(huì )將質(zhì)粒整合到染色體上，然后用相應的質(zhì)粒中的DNA去篩選細胞核，形成穩定表達的細胞株。

　　細胞株是用單細胞分離培養或通過(guò)篩選的方法，由單細胞增殖形成的細胞群。細胞株的特殊性質(zhì)或標志必須在整個(gè)培養期間始終存在。原代培養物經(jīng)首次傳代成功后即為細胞系(cell line)， 由原先存在于原代培養物中的細胞世系所組成。如果不能繼續傳代，或傳代次數有限， 可稱(chēng)為有限細胞系(finite cell line)， 如可以連續培養， 則稱(chēng)為連續細胞系(continuous cell line)， 培養50代以上并無(wú)限培養下去。

　　采用穩定細胞株構建技術(shù)能夠在極大程度上保持細胞的穩定性，從而穩定地提供蛋白產(chǎn)品，讓其不會(huì )因為不同細胞而產(chǎn)生蛋白差異的現象。而且大量表達的穩定細胞株可以在更大程度上解決大批量基因片段引入的問(wèn)題，實(shí)現更好地表達。普健生物是一家擁有15年蛋白抗體生產(chǎn)經(jīng)驗的企業(yè)，專(zhuān)業(yè)為廣大用戶(hù)提供蛋白抗體制備服務(wù)，優(yōu)質(zhì)的穩定細胞株構建技術(shù)，為您解決各類(lèi)蛋白抗體需求。