如何做好穩定細胞株的篩選工作?

　　穩定細胞株廣泛應用于重組蛋白、抗體生產(chǎn)、檢測分析等領(lǐng)域，因為其表達的蛋白穩定性好、批次間的差異小，所以，被廣泛使用與醫學(xué)領(lǐng)域。我們知道，在穩轉株構建的過(guò)程中，會(huì )涉及到一個(gè)篩選的過(guò)程，今天我們就和大家具體聊聊有關(guān)穩定細胞株篩選方面的工作。

　　如何進(jìn)行穩定細胞株的篩選呢?普健生物今天在這里和大家分享兩種篩選方法。

　　方法一：通過(guò)將質(zhì)粒整合到染色體上后，通過(guò)單克隆篩選穩定細胞株。

　　1、以10天內細胞全部死亡的抗生素濃度來(lái)作為基準濃度;

　　2、細胞接種，轉染實(shí)驗前接種的細胞，轉染細胞密度達到60%-80%的細胞;

　　3、轉染;

　　4、篩選具備抗性的細胞，并鑒定所篩選的結果;

　　方法二：利用逆轉錄病毒篩選穩定細胞株。

　　1、人源化的抗體基因轉接到慢病毒載體上;

　　2、使用包裝細胞包裝病毒;

　　3、用病毒去轉染目的細胞;

　　4、篩選出合適的細胞株;

　　其實(shí)大家也不難看出，穩定細胞株篩選的過(guò)程其實(shí)都大同小異，大體上的程序基本相同，只是在細節方面有著(zhù)一定的區別，這也是細胞株構建成功與否的原因所在。普健生物專(zhuān)業(yè)為您構建穩定細胞株服務(wù)，如果您有相關(guān)需求，歡迎來(lái)電咨詢(xún)。