現階段,除了需要應對某些特別病毒(比如新冠剛出現之時(shí)),市面上所擁有的重組蛋白產(chǎn)品基本上都能夠滿(mǎn)足我們的需求了。只要我們提出需求,結合需求尋找產(chǎn)品,基本上都能夠找到能夠一用的產(chǎn)品。但是,又有一些用戶(hù)禁不住要問(wèn)了:你們的蛋白保質(zhì)期多久?你們的蛋白為什么是凍干的?凍干的蛋白如何重構等等。今天,普健生物就在這里和大家具體聊聊。
1、重組蛋白為什么要做成凍干樣式?
其實(shí)我們知道,大部分重組蛋白對溫度非常的敏感,即便是在制備過(guò)程中溫度提升都有可能造成表達量降低或蛋白析出的情況,所以,只有使用凍干的方式來(lái)保留大部分蛋白的活性。為什么說(shuō)大部分?因為畢竟出現了一次操作,一小部分的蛋白也會(huì )因此失去活性。同時(shí),凍干粉的保存時(shí)間更長(cháng),運輸費用也相對會(huì )降低;
2、重組蛋白凍干前會(huì )不會(huì )加什么保護劑?
在對蛋白進(jìn)行凍干之前,我們都會(huì )向其中添加保護劑,比如糖類(lèi)、多元醇、聚合物、表面活性劑、某些蛋白和氨基酸。這類(lèi)保護劑不僅能夠更好地進(jìn)行凍干,也能更好地對蛋白進(jìn)行保護,降低其失活率;
3、為什么買(mǎi)的管內幾乎看不到蛋白?
其實(shí)最開(kāi)始我也覺(jué)得很奇怪,為什么看到冰柜里面凍著(zhù)一些空管?其實(shí)我們在對蛋白進(jìn)行凍干時(shí),更多的蛋白附著(zhù)在管壁內側,形成了一層很薄或肉眼不可見(jiàn)的蛋白層,乍看之下確實(shí)像是個(gè)空管;
4、凍干粉如何重構蛋白?
其實(shí)在說(shuō)明書(shū)中都會(huì )附著(zhù)一份凍干粉的使用說(shuō)明,里面會(huì )詳細介紹有關(guān)重構的方法。當然了,一般情況下我們可以選擇無(wú)菌水來(lái)進(jìn)行復溶,加入等體積的無(wú)菌水,輕輕搖晃即可。切記,千萬(wàn)不可渦旋;
5、什么是載體蛋白?
其實(shí)就是類(lèi)似保護劑,用于提高蛋白的穩定性,有助于其能夠更好地附著(zhù)在瓶壁上;
6、得到重組蛋白后要如何保存?
重組蛋白到我們手里了,但是不是現用,要怎么保存呢?其實(shí)說(shuō)明書(shū)上有它的保存方式,按照這個(gè)溫度進(jìn)行保存即可。當然了,如果已經(jīng)復溶,那就需要對其進(jìn)行分裝,并在-20度的環(huán)境下保存;
PS:大部分的蛋白的保質(zhì)期只有一年,需要將其放置在最佳保存溫度下,同時(shí)盡量不要反復凍融;
7、所得重組蛋白的數量要如何確定?
采用不同的測定方式,所得蛋白含量的差異會(huì )很大,我們通常會(huì )采用BCA、SDS-PAGE等方法進(jìn)行檢測;
如上,基本上就能解答我們需要使用蛋白的各種問(wèn)題,當然了,特殊蛋白肯定需要特殊對待,不過(guò)結合說(shuō)明書(shū),也基本上不會(huì )存在什么問(wèn)題。當然了,結合需求沒(méi)有找到合適的產(chǎn)品時(shí),我們就需要進(jìn)行重組抗體定制服務(wù),這樣才能獲得我們所需功能的蛋白產(chǎn)品。普健生物專(zhuān)業(yè)為廣大用戶(hù)提供重組蛋白制備服務(wù),如果您有相關(guān)需求,歡迎來(lái)電咨詢(xún)。
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